IDENTIFICACIÓN DE UN NUEVO BLANCO TERAPÉUTICO Y DE UN NOVEDOSO CANDIDATO A FÁRMACO PARA EL TRATAMIENTO DE LA INFECCIÓN POR EL VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA

Resumen

La terapia antirretroviral contra el VIH/sida ha logrado una reducción en la morbilidad, la mortalidad e incluso en la trasmisión viral. Sin embargo, esta terapia aún presenta desventajas, en especial la poca adherencia y la generación de resistencia viral, lo que impone la necesidad de buscar nuevos antirretrovirales. En el presente trabajo, a través de un estudio de proteómica, se determinó que el tratamiento de la línea celular MT4, con una fracción leucocitaria con actividad anti-VIH, modula negativamente los niveles de vimentina, una de las proteínas que forman los filamentos intermedios (FI) del citoesqueleto. Para dilucidar la relación de esta proteína con la infección del VIH se estableció la metodología para inducir el silenciamiento génico post-transcripcional de la vimentina en células MT4, uno de los hospederos de elección para los ensayos de evaluación de actividad anti-VIH, y se generó una línea celular knockdown para vimentina. Adicionalmente, se desarrolló un sistema basado en un vector lentiviral de tercera generación que expresa la proteína verde fluorescente, para evaluar las primeras etapas de la replicación del VIH de manera segura, ya que no requiere condiciones de bioseguridad de nivel III. Utilizando este sistema de reto, así como el ensayo tradicional de infección con VIH replicativo, se evidenció por primera vez que la disminución en los niveles de vimentina reduce drásticamente la replicación viral. A través de microscopía electrónica de trasmisión y microscopía de fluorescencia se demostró que un péptido sintético, CIGB-210, derivado de la queratina 10, modifica los FI de vimentina. Se evidenció, también por primera vez, la potente actividad inhibitoria de este péptido y su baja toxicidad, lo cual lo convierte en un promisorio candidato a fármaco contra el VIH/sida. En su conjunto los resultados de esta investigación demuestran por primera vez que la vimentina es una diana terapéutica potencial contra la infección por el VIH y que está involucrada en las etapas tempranas de la infección. A partir de estos hallazgos se propuso una novedosa estrategia para inhibir la replicación del VIH, a través del reordenamiento de la estructura de los FI de vimentina. El hecho de que el blanco sea una proteína celular en lugar de una proteína viral reduce considerablemente las posibilidades de que el virus desarrolle resistencia al tratamiento. Los resultados obtenidos están avalados por tres publicaciones internacionales: Viruses 2016 (Factor de Impacto 3.042), Biochemical and Biophysical Research Communications 2004 (Factor de Impacto 2.371) y Biotecnología Aplicada
2008, 1 patente concedida en Cuba y en EE.UU., Europa, Japón, Australia, Rusia, Sudáfrica y Tailandia, 17 participaciones en eventos nacionales e internacionales con
3 carteles premiados, 2 tesis de Maestría y 6 de Diploma, así como 3 logros científico- técnicos del CIGB. El candidato a fármaco para la terapia contra el VIH/Sida, CIGB-
210 se encuentra en etapa de desarrollo tecnológico en el CIGB